研究背景

急性心肌梗死（Acute myocardial infarction , AMI）在發(fā)病率、死亡率、醫(yī)療費(fèi)用方面是一個(gè)日益嚴(yán)重的問題。目前治療上的進(jìn)步，AMI死亡率已降低一半，但臨床之外的死亡率仍然較高。各種AMI動(dòng)物模型有助于我們對AMI的理解。

小鼠，兔子，狗，靈長類和其他動(dòng)物已用于AMI模型的制備，但在實(shí)驗(yàn)室大鼠主要用于制備AMI模型，如SD大鼠、Wistar大鼠等。目前最常用的方法是左冠狀動(dòng)脈結(jié)扎術(shù)（left coronary artery , LCA），一種是永久性結(jié)扎LCA，另一種是LCA缺血后再灌注。LCA缺血后再灌注，短暫的阻塞通常是30min， 長時(shí)間的阻塞是60-90min，造成更大面積的梗死，更高的死亡率。兩種模型方法在麻醉、手術(shù)過程、處理和組織學(xué)方面都需要類似的技術(shù)。短暫的阻塞能檢查治療方法和結(jié)局；完全的阻塞，在AMI延遲發(fā)作時(shí)，有助于我們了解心肌重構(gòu)，心血管結(jié)局，這時(shí)心肌挽救的可能性是有限的。永久結(jié)扎LCA術(shù)后的死亡率為10-50%，LCA缺血后再灌注損傷的死亡率要低得多。

永久性結(jié)扎LCA 24h后的心肌病理變化包括水腫和稀疏的心肌細(xì)胞浸潤明顯，心肌纖維變的更薄，間隔更大。LCA缺血30min后再灌注24h的心肌病理變化包括出血區(qū)，主要的多形核細(xì)胞浸潤，較少水腫，心肌纖維變薄，細(xì)胞浸潤增多。AMI引起的生化變化有ROS和RNS參與再灌注心臟的缺血后功能障礙，MDA聚集等。

研究模型

我們掌握了大鼠和小鼠急性心肌梗死模型的制備方法，以SD大鼠為例：麻醉大鼠，連上呼吸機(jī)，在第5肋間間隙，用一個(gè)蚊式止血鉗打開胸膜和心包，用夾子略微打開，縫合和結(jié)扎在距LCA起點(diǎn)約2-3 mm的位置。左心室前壁變得蒼白，結(jié)扎被認(rèn)為是成功的。結(jié)扎后，立即手動(dòng)排空空氣，關(guān)閉肌肉和胸腔皮膚。

我們掌握了大鼠和小鼠心肌細(xì)胞的原代分離方法，以SD大鼠為例：出生24h內(nèi)的乳鼠，75%乙醇消毒皮膚，取出心臟，剪去心房和血管，剪碎心室，用0.014%膠原酶Ⅱ和0.05%胰酶消化6-7次，保留上清，直至組織塊消化完畢，離心，沉淀用10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基重懸。放培養(yǎng)箱80min待心肌成纖維細(xì)胞貼壁后輕輕吹打培養(yǎng)基，收集上清，離心，加含有10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)，即為心肌細(xì)胞。

研究案例

目的：研究異槲皮素對急性心肌梗死大鼠心肌梗死的保護(hù)機(jī)制和作用

結(jié)論：異槲皮素通過抗炎和抗凋亡因子以及調(diào)節(jié)TLR4 - NF -κB信號通路來改善急性心肌梗死。

路線：

1. 異槲皮素改善急性心肌梗死大鼠心肌梗死面積通過抑制炎癥、氧化應(yīng)激和心臟細(xì)胞凋亡。

2. 異槲皮素增加急性心肌梗死大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合酶，降低誘導(dǎo)型一氧化氮合酶水平，抑制toll樣受體4核因子（TLR4 – NF）- κB信號通路。

核心文獻(xiàn)

1.Rat models of myocardial infarction. Thromb Haemost. 2006;96(5)

2.Isoquercetin ameliorates myocardial infarction through anti-inflammation and anti-apoptosis factor and regulating